BODIPY 581/591 C11是脂质氧化 (lipid oxidation) 的荧光比值探针，可用于检测细胞内和细胞膜中的活性氧 (ROS)。染料的多不饱和丁间二烯基氧化后会导致荧光发射峰从约590 nm 偏移至 约510 nm。BODIPY581/591 也是一种常用于铁死亡研究的产品。
图1.BODIPY 581/591 C11化学结构
BODIPY581/591 C11 使用方法（活细胞成像分析）
1、染色工作液的准备
a.储存液的制备：将低温保存的 C11 BODIPY 581/591 干粉从冰箱取出后置于室温至少 20min，低速离心后，加入高质量 DMSO 配制成适宜浓度的储存液，根据单次用量分装，≤-20℃保存，尽量避免反复冻融。
b. 工作液的制备：C11 BODIPY 581/591 用于活细胞染色的建议工作浓度一般是 1-10 μM，请根据细胞类型和实验目的，参阅文献，确定最佳工作浓度。用培养基或生理缓冲液稀释 10mM 储存液到所需的工作浓度，注意现配现用！
2. 染色步骤
a. 细胞铺板，37℃孵育过夜；
b. 用待研究药物处理细胞；
c.加入一定量的 10mM C11 BODIPY 581/591 储存液使其终浓度达到10μM（或做下浓度优化，测定几个浓度梯度）。37℃孵育 30min。
d.吸走培养基，然后使用 PBS 清洗三次；
e.使用荧光显微镜测定荧光。还原态染料使用Ex/Em=581/591nm（Texas Red 滤片）；氧化态染料使用Ex/Em=488/510nm（FITC滤片）来测定。
f.在590m/510nm 发射光下测定的荧光读数比值反映细胞脂质过氧化水平。
3. 图像处理和分析
分别使用Texas Red(590nm)和 FITC（510nm）发射滤片来进行荧光成像。
通过定量荧光强度和计算分别在 Texas Red(590nm)和 FITC（510nm）通道下测定荧光得比值来反映过氧化水平。
图2.BODIPY 581/591 C11荧光图谱
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